Wednesday, January 24, 2018

Hydration as a design element in biomaterials

Given what is known about water’s active role in the structure, dynamics and function of biomolecules, can it be used as a design element in synthetic molecular and nanoscale structures derived from them, which might have more amenable levels of complexity? Sam Stupp at Northwestern and colleagues ask this question in relation to the amphiphilic peptide-based nano-architectures they have been developing. They have used Overhauser dynamic nuclear polarization relaxometry to characterize the hydration of such a peptide nanofibre [J. H. Ortony et al., JACS 139, 8915; 2017 – paper here]. They find a wide range of water dyamics, from rapid translational diffusion within the hydrophobic interior to near-immobilization of water on the hydrophilic surface. Water further from the core and close to the inner peptide domain is slowed relative to the bulk, and more so for fibres in the gelled than in the solution state. The same applies to water close to the (charged) nanofibre surface, which may be slowed to a degree comparable to that of water confined within protein cavities. MD simulations echo these findings. Sam and colleagues suggest that the surface water might play an active role in gelation and interactions with biomolecules, and in consequence that “water dynamics not only play an important role in the function of nanostructured biomaterials, but… may also be tunable in soft matter at molecular length scales to optimize performance for a variety of biomedical applications.”

In a similar spirit, Geraldine Richmond at Oregon and coworkers use vibrational sum frequency spectroscopy to look at water orientational ordering close to the surface of nanoemulsion aggregates: micelles and reverse micelles [J. K. Hensel et al., PNAS 114, 13351; 2017 – paper here]. Water seems to be electrostatically ordered by the surfactant head groups and their counterions at the interface.


Proposed orientation of water at surfactant (AOT)-counterion surfaces, both for the curved surfaces of micelles and the planar surfaces of lamellae.

How exactly does one quantify water order or disorder? Various measures have been suggested; Fabio Sterpone of the Université Paris Diderot and colleagues suggest that it might be sought in the connectivity of the hydrogen-bond network (O. Rahaman et al., JPCB 121, 6792; 2017 – paper here). They have looked at this measure in simulations of the protein (here lysozyme) dynamical transition at around 240 K. There is a fairly abrupt change in the connectivity at the transition, in that the degree of percolation is constant below about 220-240 K but decreases with temperature above it. A closer analysis shows that at 240 K the hydration water network begins to sample a larger number of configuration states, corresponding to an abrupt increase in configurational entropy. Fabio and colleagues interpret these findings in terms of the hydration water acting as an ‘entropic reservoir’ that, above the dynamical transition, enables the protein to undergo configurational changes.


Probability distribution of hydration-water percolation propensity for lysozyme as a function of temperature.

Not strictly water in biology, but Daniel Munoz-Santiburcio and Dominik Marx in Bochum describe ab initio simulations of proton transport in alkaline water films confined between the layers of the mineral mackinawite [Nat. Commun. 7, 12625; 2016 – paper here]. They find that orientation and coordination of hydroxide can alter the hydrogen-bond network in ways that make transport of protons and mobility of negative-charge defects sensitive to the width of the confining space: different structures in the layered water films support qualitatively different transport mechanisms. Daniel and Dominik conclude that “it should be possible to rationally design different nanostructures that will allow for different charge transport rates of confined alkaline aqueous solutions.” Meanwhile, in another paper they show that water within mackinawite layers has a boosted tendency to self-dissociate (Phys. Rev. Lett. 119, 056002; 2017 – paper here).

And in a third paper they consider the effect of water confinement (between mineral layers) on a whole set of chemical reactions, particularly those involved in peptide formation – which may serve as a model of prebiotic chemistry at nanoconfined mineral surfaces (Chem. Sci. 8, 3444; 2017 – paper here). Under these conditions both the energetics and the mechanisms of the reactions can be significantly altered relative to the bulk.

X-ray free electron lasers are already transforming structural biology with their ability to provide diffraction data on very small samples in some cases down to the single-molecule scale, at high time resolution for studying dynamical processes. Jessica Thomaston and coworkers have used the Japanese Spring-8 XFEL source to obtain a new structure of the influenza M2 proton channel under ambient conditions (J. L. Thomaston et al., PNAS 114, 13357; 2017 – paper here). They find that an ordered network of hydrogen-bonded water molecules spans the pore at pH5.5, providing a proton-conduction pathway and stabilizing the protonated His37 residue present in the intermediate open state of the channel. These ordered waters decrease in number as pH increases and the open state becomes less stable.


The room-temperature XFEL structures of the M2 channel at different pH. Red spheres show waters with full occupancy, light and dark blue with half-occupancy.

The idea has been around for some time that water might play an important role in protein (mis)folding into amyloid fibrils associated with neurodegenerative diseases. Mei Hong at MIT and colleagues have now used solid-state NMR to characterize the reservoirs of water within and around fibrils of the Alzheimer’s β-amyloid peptide Aβ-40 (T. Wang et al., JACS 139, 6242; 2017 – paper here). They find five distinct pools, ranging from surrounding bulk-like matrix water to mobile interfibrillar water channels and relatively immobile peptide-bound reservoirs. Exchange of water happens between the two dynamic pools on very long (second) timescales. The balance between the various pools is shifted in some mutant fibrils.


The five water pools in wild-type Aβ-40 amyloid fibrils.

Much attention has been given to the roles of hydration water in the binding of ligands by proteins, but less to the idea that solvation is also important for unbinding. Paolo Carloni at Jülich and colleagues have simulated the unbinding kinetics of an anti-inflammatory agent (a urea derivative) that binds to p38 MAP kinase (R. Casanovas et al., JACS 139, 4780; 2017 – paper here). They find that a rotation of the urea group during unbinding creates a more –solvent-exposed state in which the hydrophobic interactions between the t-butyl substituent of the ligand and a hydrophobic part of the cavity are weakened. Water molecules that enter into the cavity play an essential role in this step, forming hydrogen bonds to the urea group and mediating those with residues in the cavity.

An important role for water-mediated contacts is identified in the DNA binding of transcription factors of the ETS family by Gregory Poon and colleagues at Georgia State University (S. Xhani et al., JPCB 121, 2748; 2017 – paper here). One in particular, denoted PU.1, shows a strong osmotic sensitivity in its binding, which the researchers attribute to the water-mediated binding between a tyrosine residue and DNA. Mutation of this residue removes this sensitivity. In the homologue Ets-1, which lacks this sensitivity, it seems that the same Tyr residue, while apparently engaging in the same water-mediated contact in the bound state, actually plays a different role in binding, by influencing the local dynamics of the free protein. I guess this underscores once more how hard it is to identify general rules of thumb for how hydration structures affect biomolecular function and molecular recognition.



The same and not the same: these two water-mediated contacts between a Tyr residue and DNA in the homologous transcription factors PU.1 (top) and Ets-1 (bottom) actually play different roles in the molecular-recognition process.

Cytochtome c oxidase (CcO) pumps protons across membranes using the energy of dioxygen reduction. The mechanism seems to involve a change in hydration – a switch between ‘wet’ and ‘dry’ configurations – in an internal cavity that is connected to the proton’s exit channel. Qiang Cui and colleagues at the University of Wisconsin have studied that process using MD simulations (C. Y. Son et al., PNAS 114, E8830; 2017 – paper here). They show how the protonation state of one residue acts as a switch between the dry and wet states, and that in the wet state the pKa of a Glu residue is lowered to facilitate proton transfer. Here, then, is a functional role for the dry-wet switching of the cavity.

What about the proton channel itself in CcO? It’s not in fact yet clear what route it takes – three possible channels (labelled D, K and H) have been proposed. Vivek Sharma at the University of Helsinki and colleagues use simulations to show that the H channel alone doesn’t seem able to do the job, unless a buried histidine residue is protonated (which seems unlikely); otherwise there’s a gap that the transient water networks in the channel can’t span (V. Sharma et al., PNAS 114, E10339; 2017 – paper here).

Here’s a rather old paper that I only noticed recently. Molecular recognition in proteins is still often discussed in biochemistry textbooks in terms of the induced-fit model. But there’s more to it. An alternative (if not necessarily mutually exclusive) picture has been developing recently in which binding occurs preferentially for particular, perhaps weakly populated conformations in an ensemble of protein states, stabilizing that conformation. Oliver Lange at the MPI Göttingen and colleagues used NMR to characterize the conformational states of ubiquitin in solution, and their results offer support for this notion of conformational selection (O. F. Lange et al., Science 320, 1471; 2008 – paper here). This work strengthens the idea that protein dynamics – which of course are highly influenced by hydration and by solvent fluctuations – have a prominent role in their functionality, an issue I discussed briefly in a recent column in Chemistry World (here https://www.chemistryworld.com/opinion/snapshots-of-lifes-dancers/3008393.article). The Lange et al. work was nicely summarized in a Perspective article by David Boehr and Peter Wright at Scripps (Science 320, 1429; 2008 – paper here).

In an intriguing simulation study, Sridip Parui and Biman Jana at the Indian Association for the Cultivation of Science in Kolkata have looked at the hydrophobic interactions between two hydrocarbon molecules, and also two rod-like model hydrophobes, at low temperatures (240 K) (JPCB 121, 7016; 2017 – paper here). They find that there is a second solvent-separated minimum for both systems, roughly 1 nm apart. This corresponds to weaker hydrophobic interactions between the solutes, due to stronger water-water interactions. The authors suggest that such a state could play a role in cold denaturation of proteins.

The effect of osmolytes on the denaturation of a model protein (stem bromelain) is considered in detail by Pannuru Venkatesu of the University of Delhi and coworkers (A. Rani et al., JPBC 121, 6456; 2017 – paper here). They use a whole battery of experimental techniques (fluorescence, UV-Vis and circular dichroism spectroscopy and dynamic light scattering), along with MD simulations, to study the stabilizing effect of a series of osmolytes (proline, betaine, arginine, sarcosine) against thermal denaturation. In all cases the effects seem to be caused by direct interactions. Betaine, sarcosine and arginine all interact with the protein via hydrogen-bonding. Proline, meanwhile, which confers the greatest stabilizing effect, binds in the protein’s active site.

Michael Feig at Michigan State and others have published a nice review article on biomeolecular crowding (M. Geig et al., JPCB 121, 8009; 2017 – paper here). This considers the effects of crowding on molecular diffusion, conformation and dynamics, but also on the solvent, which – as the authors say – can have altered structure, dynamics and dielectric response in typical crowded geometries.


A typical crowded environment in the cell.

Coralie Pasquier at the University of Lund and coworkers have studied the effect of electrolytes with multivalent (trivalent yttrium) ions on protein-protein interactions, using MD and MC simulations (C. Pasquier et al., JPCB 121, 3000; 2017 – paper here). The Y ions bind to the surface of the proteins (human serum albumin), but the consequences are complex. In a coarse-grained model, increasing Y3+ concentration could increase protein repulsion at low ionic strength but increase it at high ionic strength. The first situation is due to double-layer effects, the second is a Coulombic repulsion due to high charging of the protein surface. These interactions are water-mediated, and screened out by addition of NaCl, resulting in protein attraction. At intermediate concentrations of YCl3 there is also a net attraction between the proteins, due to ion-ion correlations.

Takeshi Yamada of CROSS in Naka, Japan, and coworkers have used quasi-elastic neutron scattering to look at the dynamics of water sandwiched between phospholipid bilayers (T. Yamada et al., JPCB 121, 8322; 2017 – paper here). They see three distinct populations of water molecules: free and almost bulk-like, loosely bound and tightly bound to the phospholipid head groups.

Concentrated ionic solutions aren’t so commonly encountered in biology, but they are important in some technologies, such as rechargeable aqueous batteries. Water is known to have slowed rotation in such solutions, and Wei Zhuang of the Fujian Institute of Research on the Structure of Matter and coworkers suggest why (Q. Zhang et al., PNAS 114, 1123; 2017 – paper here). Their simulations suggest that the key contribution comes from a coupling of the slow, collective component of rotation with ion clusters, rather than from faster single-molecule motions. They say that there are similarities with water rotations near large biomolecules.

Do we finally have an accurate, predictive, tractable ab initio model of water? Mohan Chen at Temple University and collaborators think so (M. Chen et al., PNAS 114, 10846; 2017 – paper here). They call their model the strongly constrained and appropriately normed (SCAN) density functional, and say that it captures many of the structural, dynamic and electronic properties of liquid water as well as the density difference with ice Ih.

Talking of such things, Tomotaka Oroguchi and Masayoshi Nakasako of Keio University say that to accurately simulate the directionality of hydrogen bonds from donor atoms in hydrophilic amino acid residues, one needs to include in the force fields off-atom charge sites that mimic the lone-pair electrons (Sci. Rep. 7, 15859; 2017 – paper here).

64 comments:

reda gamal said...

شركة ركن الشروق في الاحساء تقدم لكم افضل الخدمات واكثرها طلبا لعملائنا الكرام فشركتنا الرائده في مجال خدمات المنازل بأنواعها المختلفه عليك التواصل معنا نصلك في اسرع وقت ونحن في انتظارك شركة مكافحة حشرات بالاحساء
شركة تنظيف خزانات بالاحساء
افضل شركة تنظيف مجالس بالاحساء
شركة كشف تسربات مياه بالاحساء

شركة ركن الرياض افضل شركة تقدم جميع الخدمات المنزلية بأقل الاسعار وبأعلى جوده من تنظيف خزانات ومكافحة حشرات وغيرها من الخدمات وللمزيد شركة تنظيف خزانات بالأحساء



Hatsune Miku said...

Makasih ya min informasinya salam hangat dan salam sukses selalu buat blognya
semoga tambah maju blognya...
jangan lupa mampir ke blog saya yaa ^_^
- obat kuat viagra
- viagra asli
- obat viagra jakarta
- obat kuat viagra
- viagra asli
- obat viagra jakarta

- kangen water
- mesin kangen water
- harga mesin kangen water
- kangen water
- mesin kangen water
- harga mesin kangen water
- beauty water
- harga beauty water

- air gunung salak
- bahan baku isi ulang
- air gunung salak
- bahan baku isi ulang
- air gunung salak


thank for author Blog your blog is Good succses and happynes for you ^_^

Krystal Barnett said...

Life-time Replacement is something which you rarely find, as you Buy facebook reviews. Solitary a handful of great service providers provide this. buy facebook likes reviews

Biosyn said...

Life Science services like Peptide Synthesis,
Custom Peptide Synthesis,
Peptide Synthesis Services,
Peptide Synthesis Company at
http://www.biosyn.com/peptide-synthesis.aspx

Happy said...

best topics! Feel good when you read your article.

เกมสล็อต

jesi k said...

Easily, the is really the best topic on this registry related issue. I fit in with your conclusions and will eagerly look forward to your next updates. Just saying thanks won't you need to be sufficient, for the fantasti c lucidity in your writing. I'll instantly grab your rss feed to keep informed of any updates.water in crawl space

على جمال said...

((خدمات النظافة بالرياض))
تنظيف الموكيت بالرياض
تهتم بعمليات التنظيف وغيرها فالهدف الاول هو راحة العملاء و اكتساب ثقتهم مهما تكلف الامر مع ضمان جودة الخدمات المقدمه و سرعة انجازها بكل سهوله.شركة تنظيف سجاد بالرياض,شركةغسيل سجاد بالرياض,شركة تنظيف السجاد والموكيت بالرياض
شركة تنظيف كنب بالرياض,شركة غسيل كنب بالرياض
شركة تنظيف واجهات بالرياض
تسليك مجارى بالرياضlevel
افضل شركة تسليك مجارى بالرياض
((خدمات مكافحة الحشرات بالرياض))
شركة مكافحة النمل الابيض بالرياض
شركة مكافحة الفئران بالرياض



على جمال said...


تقدم شركة خدمات التنظيف وكشف التسربات بالرياض حيث ان الشركة لها باع طويل فى تقديم الحلول فى مجال النظافه
وهناك بعض الخدمات منها كماتقدم الشركة كفاه خدمات التنظيف وكشف التسربات والغزل عميلانا العزيز تفضل بزياره
شركة مكافحة الفئران بالرياض
شركة مكافحة النمل الابيض بالرياض
شركة كشف تسربات المياه بالرياض
شركه تنظيف مكيفات بالرياض
ارخص شركة تنظيف منازل بالرياض
افضل شركة تنظيف منازل بالرياض
شركة مكافحة حشرات بجازان
افضل شركة تنظيف بجازان

arabian marketing said...

الحصول على مياه نظيفة هي مهمة شركة تنظيف خزانات بجدة التي تعمل على اتباع احدث اساليب و مراحل تنظيف الخزان كما يوجد خدمات شركة تنظيف بالبخار بجدة و هذا لأننا نحاول أن نجتهد لكي نقدم إلى العميل الخدمات المثالية شركة مكافحة حشرات بجدة و التي تساعده شركة مكافحة البق بجدة على الحصول على أفضل النتائج لكي تطمئن إلى ان المياه التي تشربها شركة تنظيف شقق بجدة هي مياه معقمة و مطهره خالية من الجراثيم أو الميكروبات التي من الممكن أن تؤدي إلى انتشار الامراض بشكل.

arabian marketing said...

الحرص على استخدام المطهرات شركة تنظيف بالبخار بجدة و المواد التي تعمل على تعقيم شركة تنظيف كنب بجدة المنزل باستمرار و رشها شركة مكافحة البق بجدة لكي يتم القضاء على الجراثيم و الميكروبات افضل شركة تنظيف الخزانات فى جدة و إذا كنت تواجه أي مشكلة شركة مكافحة حشرات بجدة مع الحشرات يمكنك أن تتصل شركة تنظيف شقق بجدة على افضل التي تستخدم المبيدات اللازمة و التي تعمل على التخلص من الحشرات نهائيا و ضمان أن لا تعود مرة أخرى فنحن نهتم بأن نقدم إليكم جميع الخدمات التي تعمل على راحتكم

arabian marketing said...

شركة البيت السعيد افضل شركة كشف تسربات بالقصيم تستخدم دائما ما شركة كشف تسربات بالقصيم يناسب وضعها ومكانتها فى سوق العمل افضل شركة كشف تسربات المياه بالقصيم , نحن نقدم اليكم خدمتنا , فاذا استعنت بنا فانت افضل شركة مكافحة حشرات بالقصيم الرابح الاكبر لا تترد افضل شركة عزل خزانات بالقصيم فى الاتصال وسوف نصلك فى اى مكان , شركة البيت السعيد افضل افضل شركة عزل اسطح بالقصيم وعلاجها وافضل شركة عزل مائى بالقصيم .

arabian marketing said...

مجال التعليق الصوتي أصبح الآن فويس اوفر من أكثر المجالات شهرة ولابد من ان يعمل الشخص موشن جرافيك على تنمية المواهب و المهارات لديه إن كان يريد أن يصبح كورس فويس اوفر أفضل و مميز في مجاله حيث ان التعليق الصوتي لا يعتمد على الصوت فقط و إن كان اهم شي كورس التعليق الصوتى و لكن لابد من وجود بعض المهارات كورس الدوبلاج الاخرى التي تعمل على جعلك من المحترفين في هذا المجال

arabian marketing said...

حافظى دائما على البيت صباغ بالكويت عطرا تفوح من ارجاء المنزل وهذا ما تفعله فني ستلايت بالكويت و لكن هل يمكن تعطير المنزل قبل التخلص شركة تنظيف بدبي من الروائح الكريهه فى مفروشاته فني كهرباء بالكويت و من المواد المتوفره فى مطبخك دائما ما تساعد شركة نقل عفش بالكويت على امتصاص هذه الروائح الكريهه هى الكربوناتو و البيكنج صودا قومى بنثر احدى المادتين ليلا على المفروشات الارضيه

arabian marketing said...

تعد شركة ويب السعودية افضل شركة تصميم مواقع بالسعودية من الشركات التى افضل شركة تصميم مواقع بالرياض تعتمد على تقديم خدمات التسويق الالكتروني افضل شركة تسويق الكتروني بالسعودية وخدمات اشهار المواقع فى جوجل افضل شركة تسويق الكتروني بالرياض والفيس بوك وتويتر وتعمل على سرعة الإنتشار لذلك فهى تعتبر افضل شركة تسويق

arabian marketing said...

تعتبر شركتنا افضل تسليك مجاري الكويت تعتبر جهاز الكمبريسور تسليك مجاري بالكويت من أهم الأجهزة المستخدمة تسليك مجاري فى الكويت في جميع أعمال تسليك المجاري شركة تسليك مجاري بالكويت حيث يعمل جهاز الكمبريسور على حل تسليك مجاري الكويت جميع مشاكل الانسداد شركة تنظيف منازل بالكويت الداخلي في المنزل .

arabian marketing said...

تقدم افضل ما لديها في خدمة نقل العفش شركة نقل عفش بمكة حيث توفر افضل شركة فك وتركيب اثاث ايكيا بمكة جميع الآلات والمعدات الحديثة والمتطورة شركة نقل اثاث بمكة التي تستخدم في عمليات نقل العفش مثل الفك والتركيب والتغليف ويتم فك وتركيب الدواليب والاسرة والستائر بها .

arabian marketing said...

من الممكن أن نقوم شركة نجيل صناعي بتوفير السور الذي يعمل على إعطاء شركة تجهيز ملاعب المظهر الجمالي حيث أنه يكون عبارة شركة نجيل صناعي وترتان عن وضع النباتات و النجيل الصناعي شركة لاندسكيب داخل السور و هذا يجعله يبدوا و كأنه شركة تنسيق حدائق زهرية كبيرة تكون حول الحديقة و الأسوار تكون مزخرفة من أجل أن تعطي المظهر الجذاب الذي ترغبون به

pakescorts646 said...

The time changes with generations and people’s demands are at high peak they always look for some classy amusement. To make your life fill with full of fun we are always active to provide you the hottest and classy Escort in Karachi. You can be the happiest person on earth while spending time with our angels who specially arrived for your sexual feelings. Many travelers came to Karachi for having some fun With Karachi Escorts and visiting the historical places and adventurous places.

Superman RED said...

Thanks for sharing that knowledge.

Fifa55

tong vo said...

nice thank you for share this information. online custom essay writing service is to provide the many essay papers and students thesis papers. and it
abcya | hooda games

โชติ ธรีะวิท said...

Thank you for posting the great content…I was looking for something like this
isc888

juliana dyab said...

من خلال اختيار المجموعة ، يتم التعرف على أعمالنا من خلال الأخلاق العالية والساهرة لإعطاء الصنعة والدقة في إكمال الإدارة التي يقدمونها فى مجال تنظيف المنازل نحن نستخدم أحدث الأجهزة التي تؤثر على التنظيف لمعالجة بسيطة وأساسية. نحن نستخدم منظفات من الدرجة الأولى لإعطاء لمعان ولمعان للأثاث ليعود إلى ما كنت فيه
شركة تنظيف

تنظيف منازل

تنظيف كنب

تنظيف بيوت

تنظيف مطابخ

شرکة تنظیف منازل

marketing for all said...

إذا كنت ترغب في الحصول على مياه نقية افضل شركة كشف تسربات بالقصيم و خالية من الجراثيم و الميكروبات فلابد ان تقوم بتوفير افضل شركة عزل خزانات بالقصيم أجود خامات العزل على الخزان و التي يتم تركيبها في الجدرا و في قاع الخزان و ذلك من اجل المحافظة افضل شركة اسطح خزانات بالقصيم على منع تعرض أشعة الشمس بشكل مباشر على المياه و تسلطها بشكل افضل شركة مكافحة حشرات بالقصيم دائم مما يؤدي إلى التغيير في الخواص الفيزيائية في مكونات المياه

marketing for all said...

لدى الصراصير جهاز استشعار شركة تنظيف بالبخار بجدة حساس جدًا موجود في قرونها مع العلم أنها شركة مكافحة حشرات بجدة لا عين لها ولا تستطيع الرؤية لكنها إن دخلت شركة تنظيف خزانات بجدة في منزل فإنها سرعان ما تهاجمه وبالتالي يصعب السيطرة شركة تنظيف شقق بجدة عليها حيث أنها تتكاثر بسرعة وبأعداد كبيرة فإذا كان منزلك به صراصير شركة مكافحة البق بجدة فمن الأفضل الاتصال بشركة متخصصة للقضاء عليها في الحال.

marketing for all said...

في البداية نحرص عبلي شركة تنظيف بالبخار بجدة ان يتم تفريغ الخزان من المياه شركة تنظيف خزانات بجدة و من بعدها نقوم بتوفير النظافة الدقيقة شركة مكافحة العتة بجدة لجميع اجزاءه الداخلية و الخارجية و من شركة مكافحة حشرات بجدة بعدها نحرص علي ان يتم اتباع افضل مواد العزل الامنة و التي شركة مكافحة النمل الابيض بجدة لا يمكن ان تلحث اي نوع من الضرر بالانسان و لهذا تواصل معنا عزيزي العميل لتجد خدمة تنظيف للخزان الخاص بالمنزل

marketing for all said...

من الممكن أن يحصل العملاء شركة تجهيز ملاعب على أفضل أنواع النجيل الصناعي التي يرغبون شركة نجيل صناعي بها و التي تتنوع بين أكثر من شكل مختلف حيث يوجد النجيل المتداخل ، النحيف و العريض شركة تنسيق حدائق أيضا و جميع تلك الأنواع متوفرة في شركة لاندسكيب بالقاهرة من أجل أن تحقق إليكم الخدمات التي ترغبون شركة تجهيزات حمامات سباحة في الحصول عليها و ذلك لأننا متميزون في مجال تركيب النجيل الصناعي و نحاول أن نلبي جميع احتياجات عملائنا

marketing for all said...

هناك طريقتين يتم استخدامهم من أجل تنظيف تسليك مجاري الكويت مواسير الصرف الصحي و هما الطريقة اليدوية و الطريقة تسليك مجاري بالكويت الحديثة و الطريقة الاولى يتم اتباعها إذا كانت المواسير تسليك مجاري الكبيرة و التمديدات تعاني من انسدادها من خلال الأشجار بها و في تلك الحالة يتم التدخل من قبل متخصصين يقوموا بقطع تلك الأشجار و تحويلها إلى قطع صغيرة من أجل أن شركة تنظيف بالكويت يتم تنظيفها بالكامل

marketing for all said...

تعتبر الواجهات شركة تنظيف بدبي من أهم الأماكن التي يجب تنظيفها على أكمل وجه، حيث أن نظافة شركة تنظيف بالشارقة الواجهات هي دليل على نظافة المنزل؛ لهذا شركة تنظيف بدبي يجب الاهتمام بها بشكل كبير وذلك من خلال شركة تنظيف فى دبي التواصل مع شركة تنظيف واجهات منازل في الشارقة شركة تنظيف بعجمان فإن الشركة سوف تتمكن من القيام بهذه المهمة مع اختلاف أنواع المنظفات

marketing for all said...

عندما يكون هناك ارتباط بين عملية التنظيف شركة تنظيف شقق بمكة وانتشار الأمراض والجراثيم شركة مكافحة حشرات بمكة يجب ان يتم التخلص من جميع الأتربة والأوساخ في المكان مثل الشقة او الفيلا او المنزل الذي نعيش بداخله شركة مكافحة حشرات بالطائف حتى يتم حماية أطفالنا من خطر الإصابة بالأمراض وتوفر شركة تنظيف منازل بمكة جميع خدمات شركة تنظيف خزانات بالطائف التنظيف سواء التنظيف العادي او خدمات غسيل شقق بمكة او غسيل منازل بمكة شركة تنظيف خزانات بمكة ومن أهم ما يتم القيام به لخروج الخدمة بصورة مشرفة أمام العملاء

marketing for all said...

نحن متخصصون في مجال التنظيف بالبخار لثقتنا شركة تنظيف بالبخار بجدة الدائمة في أن النظافة وحدها لا تكفى ويجب أن نوفر التعقيم شركة تنظيف بالبخار بمكة والتطهير معها لضمان مكان نظيف وصحي شركة تنظيف بجدة خالي تماماً من البكتريا والجراثيم خاصة شركة نقل عفش بمكة في وجود الأطفال فالبخار تقنية شديدة التأثير في قتل البكتريا والجراثيم لذلك نحرص على استخدامه ونوفر شركة تنظيف سجاد بالبخار بجدة أحدث التقنيات التي تعمل بالبخار لتقديم خدمات على مستوى عالي من الدقة والإتقان وتقوم

marketing for all said...

وقد اثبتت الدراسة والابحاث ان تلوث مياه الخزان شركة نقل عفش بجدة نتيجة المواد المصنوع منها الخزان ويعتبرافضل انواع الخزانات المصنوعة شركة تنظيف بالبخار بجدة من الحديد المجلفن او المصنوع من الزجاج وهم واقل عرضه للتلوث واغلاقه بطريقة جيدة فحرصا منا نحن شركة غسيل خزانات بالطائف شركة مكافحة حشرات بمكة على صحتنا وصحة اطفالنا يجب شركة تنظيف خزانات بالطائف تنظيف خزان المياه بصفة دورية حتى نتفادى جميع الامراض شركة تنظيف كنب بدبي ونقي اولادنا وانفسنا منها ونستخدم الخزان المصنوع من الصلب الغير قابل للصدا والمصرح به من وزارة الصحة.

marketing for all said...

عملية النظافة يجب ان تكون سلوك لدي المتواجدين شركة تنظيف بمكة في المكان فلا يمكن ان يتم إجبار فرد على التنظيف شركة مكافحة حشرات بمكة والعيش في مكان خالي من الأتربة اذا لم يكن لدية ذلم السلوك الحضاري الراقي شركة تنظيف بالبخار بمكة وعليه يجب على الأفراد دائما مساعدة شركة نقل عفش بمكة افراد العائلة أثناء عميلة التنظيف وزرع ورح شركة تنظيف خزانات بمكة النظافة داخل أبنائنا وأسرنا وعندما تتعرض إلى الاوساخ الصعبة فان في الجوار

marketing for all said...

يمكنك التواصل مع شركة تنظيف بدبي في أي وقت من أجل أن يقوم فريق العمال شركة تنظيف بالشارقة و الخبراء بالحضور إلى المنزل في الميعاد الذي تقوم شركة تنظيف بعجمان بتحديده حيث أن الفريق معروف بمدى التزامه بالمواعيد و الاتقان شركة تنظيف بابو ظبي في العمل فنحن نرغب في توفير الخدمة المثالية التي تمكنا من الحصول شركة تنظيف كنب بدبي على ثقة العميل الكبيرة بنا فنحن نجتهد لكي نستحق تلك الثقة بشكل مستمر

marketing for all said...

يعمل فريق الخبراء على تقديم التصاميم واجهات حجر هاشمى هيصم المختلفة الخاصة بالمطابخ أو الحمامات شركة تنظيف بدبي و يمكنك الاختيار فيما بينها و هذا من خلال حجر مايكا شركة تسليك مجاري بالكويت الذي يعمل على توفير الدعم و القوة على الغرف الموجودة في المنزل و تتعامل الشركة رقم صباغ رخيص بالكويت معكم بأقل الاسعار و التكاليف التي فني كهرباء منازل بالكويت لا مثيل لها في أي مكان آخر

Taimoor said...

You make decisions in your present and future according to your past decisions.
If your past experiences were not good in reference to transfer of bitcoin exchange to PayPal account,
then you would definitely avoid to face such experience again. If other exchange companies like in your
list of bad companies then you need to realize that it’s the right time to be our customer.
selling crypto coins

supersonic100g9 said...

รถเช่าสุวรรณภูมิ สำหรับผู้ที่เดินทางมาจากเมืองนอก หรือบ้านนอก มาลงเครื่องที่ท่าอากาศยานสุวรรณภูมิ เพื่อมาท่องเที่ยว หรือทำธุระต่างๆถ้าเกิดท่านกำลังมองหารถเช่า พวกเราขอชี้แนะ Banana rent-a-car รถเช่าคุณภาพดี ราคาไม่แพง รถยนต์ทุกคันผ่านการตรวจสอบก่อนส่งรถยนต์ ด้วยเหตุผลดังกล่าวสามารถเชื่อมั่นได้ว่าทุกการเดินทางของคุณจะไม่เป็นอันตราย ไร้กังวล เนื่องจากว่าพวกเราเป็น บริษัทยานยนต์เช่าที่พร้อมให้บริการ #รถเช่าสุวรรณภูมิ
บริษัทรถเช่า
รถเช่าสุวรรณภูมิ
รถเช่าระหว่างซ่อม
รถเช่าไม่ใช้บัตรเครดิต
เช่ารถเก๋ง
รถรับส่งสนามบิน

creative peptides said...

Peptide stapling is a strategy for constraining short peptides typically in an alpha-helical conformation. Stapling is carried out by covalently linking the side-chains of two amino acids Stapled Peptide Design

Pankaj Ogeninfo said...

Thank you so much for this valuable information sharing with us. Visit for Website Development & Designing Services.
SEO Service in Delhi

Mutual Fundwala said...

Awesome blog, thanks for sharing with us. Visit Mutual Fund Wala to know about mutual fund schemes in India.
Investment Advisor in Delhi

Kala Kutir said...

Thank you so much dear for sharing this valuable information. Get incredible stories and amazing photography at Lifestyle Magzine.
Lifestyle Magazine

Poojarao said...

Rice Bags Manufacturers
Pouch Manufacturers
wall putty bag manufacturers
Lyrics with music

Poojarao said...

we have provide the best ppc service.
ppc agency in gurgaon
website designing company in Gurgaon
PPC company in Noida
seo services in gurgaon

Poojarao said...

we have provide the best fridge repair service.
fridge repair in faridabad
Videocon Fridge Repair in Faridabad
Whirlpool Fridge Repair in Faridabad
Washing Machine Repair in Noida
godrej washing machine repair in noida
whirlpool Washing Machine Repair in Noida
IFB washing Machine Repair in Noida
LG Washing Machine Repair in Noida

Poojarao said...

Bali Honeymoon Packages From Delhi
Bali Honeymoon Packages From Chennai
Hong Kong Packages From Delhi
Europe Packages from Delhi
Bali Honeymoon Packages From Bangalore
Bali Honeymoon Packages From Mumbai
Maldives Honeymoon Packages From Bangalore
travel company in Delhi

sara said...

thank you
http://www.ju.edu.jo/
UJ
UJ

Just Info said...

Kala Kutir Pvt Ltd provide one of the best Commercial Vehicle Wrap, Godown Floor Marking Painting and Vinyl Signage Printing Services in Delhi, India.
Godown Floor Marking Painting

شعبو اسامة said...

هل لديك منزل تريد تنظيفه بشكل ممتاز وبعمال متخصصون وبمعدات وخامات عمليه وفعاله وبشكل ممتاز للغاية فعليك التوجه والاتصال بشركتنا هل لديك فيلا او قصر وتريد تنظيفهم من جميع مزاياهم ومن الاتربة والغبار ومن جيع اعمال النظافة الشاقة فعليك التوجه والاتصال بشركتنا واذا كان لديك مصنع او حديقة او شركة او اي مكان يحتاج للنظافة فعليك ان تتصل بنا علي الفور
نقل اثاث في الدمام السعوديه

ارخص شركة نقل عفش بالدمام

نقل اثاث في الدمام السعوديه بيزات

سيارات نقل عفش بالدمام

شركة تخزين عفش بالدمام مستودعات امنة

افضل شركة لنقل العفش بالدمام بدائية

سيارات نقل عفش بالدمام

شركة مقاولات بالدمام شركة بسمة الخليج

افضل شركة مقاولات بالدمام لاعمال البن


ammar said...

شراء الاثاث المستعمل بالمدينة المنورة
مكافحة حشرات بالمدينة المنورة

شراء اثاث مستعمل بالرياض

شركة مكافحة النمل الابيض بالرياض
شركة مكافحة حشرات بجدة
شركة تخزين اثاث بالرياض

ammar said...

شركة تنظيف بالشارقة

شركة تنظيف منازل في الشارقة

خدمات التنظيف في الشارقة

شركة تنظيف الشارقة

شركات تنظيف الكنب في الشارقة

شركات تنظيف المباني في الشارقة

خدمات تنظيف المنازل الشارقة

شركة تنظيف فلل بالشارقة

شركة تنظيف فلل في الشارقة

شركات تنظيف بالساعه في الشارقة

شركات تنظيف الكنب في الشارقة

خدمات تنظيف بالساعه الشارقة

شركات التنظيف في الشارقة

mmdoh said...

شركة تنظيف بالشارقة

شركة تنظيف منازل في الشارقة

خدمات التنظيف في الشارقة

شركة تنظيف الشارقة

شركات تنظيف الكنب في الشارقة

شركات تنظيف المباني في الشارقة

خدمات تنظيف المنازل الشارقة

شركة تنظيف فلل بالشارقة

شركة تنظيف فلل في الشارقة

شركات تنظيف بالساعه في الشارقة

شركات تنظيف الكنب في الشارقة

خدمات تنظيف بالساعه الشارقة

شركات التنظيف في الشارقة

mmdoh said...

مكافحة الفئران الشارقة

ارقام شركة مكافحة حشرات الشارقة

شركة مبيدات حشرية الشارقة

شركة مكافحة حشرات بالشارقة

شركات مكافحة الحشرات المعتمدة من بلدية الشارقة

Unknown said...

kadang-kadang mengikut alur permainan lawan atau kadang-kadang turut walau kartu yang Anda peroleh kurang menyakinkan
asikqq
dewaqq
sumoqq
interqq
pionpoker
bandar ceme
hobiqq
paito warna
http://199.30.55.59/asikqq78/
datahk 2019

will1234 said...

gclub
สมัคร จีคลับ
สมัคร บาคาร่า
สมัคร gclub

محمد على said...


شركة مكافحة حشرات بالرياض
شركة مكافحة النمل الابيض بالرياض
شركة رش مبيدات بالرياض
شركة رش دفان بالرياض
شركة مكافحة الصراصير بالرياض
شركة مكافحة الفئران بالرياض
شركة مكافحة النمل الاسود بالرياض
شركة مكافحة البق بالرياض
شركة مكافحة الوزغ بالرياض
شركة مكافحة الحمام بالرياض

kayan web said...

شركة تنظيف فلل بالرياض Perfect cleaning and cleaning of the villa's rooms and the use of a vacuum cleaner to remove dust and soil.شركة تنظيف بالرياض The beauty and cleanliness of the place gives the use of steam cleaning machines that remove stains accurately and quickly and are used to clean canes and boards.
شركة تنظيف بالخرج Carpets, carpets and ceramics. If you are unable to execute these tips from شركة تنظيف منازل بالخرج .
شركة مكافحة الحمام بالرياض We provide you with a range of tips that prevent the nesting of the bathroom on the surface of your home you clean the surface and balconies from the remnants of the grain and clean it from waste and used furniture
شركة تنظيف منازل بالمدينة المنورة We have the ability to make your home an oasis of cleanliness and beauty. We have a dedicated team to clean every part of your home, but we are keen to provide important tips to keep your house clean for as long as possible. شركة تنظيف بالمدينة المنورة Use a vacuum cleaner to get rid of accumulated dust on a daily basis. Cleaning the glass home facades provides a perfect look for the home Provide you with a great service in cleaning your house if you can not do this hard work and effort شركة نقل عفش بالمدينة المنورة .
شركة تنظيف بينبع Provide you with a distinctive service in all types of private cleaning Carpet carpet cleaning using the steam cleaning machine makes it clean and fully sterile.
شركة نقل اثاث بينبع It is an ideal choice to carry out your home furniture without any effort or hardship. But if you want to do it yourself, arrange the clothing bags for your family so that you can remove the tires and wooden rooms easily. Transportation. Many things you can do .
شركة تنظيف منازل بمكة It is the best choice for you to clean the perfect parts of your home - Carpet cleaning and carpeting the best types of steam cleaning machines or sent to Cleaning and cleaning of beds and boards and putting mattresses on them to prevent the accumulation of dust and stains on them You must use high quality detergents to ensure high quality cleaning of all the items and parts of your home You need a daily cleaning of the kitchen and bathrooms to give a recovery and confidence in the cleanliness of the whole house شركة تنظيف خزانات بمكة Able to clean your home without bothering you or get tired at great cheap prices.
Visit our website
https://www.allsaad.com/

kayan web said...


شركة تنظيف بالمدينة المنورة Is one of the best companies currently located in Al Madinah Al Munawwarah, Saudi Arabia. Since the company started its activities more than twenty years ago, it has endeavored to develop all its services and made sure to provide the best service at the highest level of quality in cleaning and disinfection at the lowest prices possible. The company believes that the company's employment is a mirror that reflects the efficiency of the company that boasts of it. The worker must be confident and credible to provide the customer with everything he can provide. JAL cleaning and sterilization found in شركة تنظيف منازل بالمدينة المنورة .
شركة نقل اثاث بالمدينة المنورة Providing customers with transportation services of furniture and furniture and storage of furniture using the latest methods and methods and modern techniques and trained workers and freight cars specially equipped to transport furniture and clothes to anywhere inside or outside Medina, customers often need a city to transfer furniture to move furniture from their offices or homes Or their companies to new places but are afraid of their loss of damage or loss, but our company guarantees its customers to complete the transfer process safely and safely without being exposed to any piece of fracture or loss as the company provides a service to lift and download furniture using a hydraulic winch The only available within شركة نقل عفش بالمدينة المنورة .
شركة تنظيف بينبع The company's services include all kinds of services needed by customers such as house cleaning services, apartments, cleaning services for ground and upper water tanks, cleaning of palaces and cleaning services for hotels, residential complexes, mosques, parks, facilities and others. Types of Services The main governmental and private bodies cooperated with the cleaning company in Yanbu. Our company has provided them with the most complete image that has impressed them and increased their confidence in the skill and efficiency of our company and its employees. P safe and effective when providing various cleaning services such detergents, but inside there is no شركة تنظيف منازل بينبع .
شركة نقل اثاث بينبع Is one of the largest furniture transport companies in the city of Yanbu, which is known for providing services at the highest level and the company always offers offers and discounts and wonderful offers on the cost of services and this is what surprises customers and make them always put them the only choice for them, we have a professional team of carpenters who oversee the distinguished operations Dismantling and installing furniture and repair and maintenance of any fractures, as the company has workers polishing furniture and wooden furniture with effective polishes to remove the dirt from the layers of paint and make the furniture bright shiny like new, after the completion of cleaning the workers of evil Of furniture with materials encapsulates the strength and durability to protect the furniture from the external shocks or natural factors such materials are available only from within شركة نقل عفش بينبع
Visit our website
https://fajr-sate3.com/

kayan web said...


The task of moving a catcher needs to rely on شركة نقل عفش بالمدينة المنورة It is specialized and has a long history in this field, helping it to carry out the task of transporting the baggage without causing any problems. Among the precautions taken by the company during transport of the luggage are the following: High-quality packaging materials to ensure that no problems are encountered during transport, the luggage is loaded into the car very carefully so as not to be subject to any problems during transportation. The luggage is re-connected to the place where it is transported and the packaging that is placed on the pallet is removed. During transportation. , All the transferred items are written to make sure that there is no defect in the piece, therefore you will ensure the transfer of the baggage without being exposed to any problems during transportation, شركة نقل اثاث بالمدينة المنورة .
Is characterized by شركة تنظيف بالمدينة المنورة With the experience and efficiency in the task of cleaning, as it uses the best equipment and the latest in addition to many aspects that focus on them to ensure that the cleaning is done to the fullest, and the most important things that you find in the fast service company and nowhere else find the following: It depends on the best detergents that can eliminate stains and smears, follow a certain system in the cleaning task; for this reason it ensures that it reaches the best results, depends on the latest methods such as steam cleaning method which proved its efficiency in the cleaning work, During which to eliminate all germs and The bacteria that are present in the place and maintain the health of the present, possess the best specialized perfumes that you can only find شركة نظافة بالمدينة المنورة.
that شركة تخزين اثاث بالمدينة المنورة It can store any quantity of furniture even if it is huge. This is because the company owns large warehouses divided into many sections. It packs and puts furniture in cars and is transported to the stores equipped with the highest level and has the latest means of monitoring. شركة تخزين عفش بالمدينة المنورة You will get satisfactory results without having to pay a lot of money in return
Be aware شركة تنظيف بينبع Cleaning works require the latest equipment for cleaning and the best detergents. This is what it provides to its customers. Therefore, it ensures the results. The company can clean any place, Will t D have شركة نظافة بينبع Discounts and offers can not be found elsewhere
The task of moving furniture from one place to another can not be done by anything, but it must rely on a specialized company such as شركة نقل اثاث بينبع ، As it will provide you with assurance that the furniture transfer works will be done well and will not be exposed any piece of the pieces to any problems during the transfer of furniture. In addition, it will carry out a comprehensive inspection of all parts before and before the transfer. The best packaging tools are used in this task. you only have to communicate with شركة نقل عفش بينبع .
Visit our website
https://www.zeenclean.com/
خدمات تنظيف

kayan web said...


considered as شركة نقل عفش بالمدينة المنورة The company has a fleet of vehicles equipped to transport the baggage to any area inside or outside Saudi Arabia, at the lowest possible cost, without any losses at all, where the employment When you contact us, our representative will contact you wherever you are, to inspect your existing furniture, determine the appropriate transportation method and the number of workers required to do so, agree on the appropriate time for the customer to transport, and determine the method of payment. Pric you, all you have is the contact numbers شركة نقل اثاث بالمدينة المنورة We pray wherever you are
To visit the site
https://www.elkhalegelaraby.com/
خدمات نقل عفش واثاث

kayan web said...


Welcome to the official website of our company to clean apartments, houses, villas and shops in Saudi Arabia This is because we are the best home services company at the moment and by the testimony of our valued customers, the workers who work in the company have a very high experience in the field of cleaning in general, as well as we will give you cleanliness of the highest quality and the lowest prices with the testimony of customers, our goal is to satisfy our customers to the highest degree possible and thanks to God always First of all, thanks to the workers and technicians, we were able to satisfy all the customers who contracted with the company and contacted them, because we specialize in cleaning, sewerage and transport of luggage just contact us and you will notice that your house as if it is completely new from the intensity of cleanliness.
شركة الصفرات للتنظيف بالرياض
شركة الصفرات لتنظيف الخزانات بالرياض
شركة الصفرات لمكافحة الحشرات بالرياض
شركة الصفرات لنقل الاثاث بالرياض
شركة الصفرات لكشف التسربات بالرياض
شركة تنظيف بالمدينة المنورة
شركة تنظيف بينبع
https://www.cleanriyadh.com/

kayan web said...


شركة الصفرات للتنظيف بالرياض
شركة الصفرات لتنظيف الخزانات بالرياض
شركة الصفرات لمكافحة الحشرات بالرياض
شركة الصفرات لنقل الاثاث بالرياض
شركة الصفرات لكشف التسربات بالرياض
https://www.beat-elkhibra.com/

kayan web said...

شركة نقل عفش بالمدينة المنورة
نقل عفش بالمدينة المنورة
شركة نقل اثاث بالمدينة المنورة
https://www.vipfurnituremoving.com

kayan web said...



شركة تنظيف بالمدينة المنورة
شركة نظافة بالمدينة المنورة
https://www.cleaningcompanyusa.com/

kayan web said...

House cleaning company in Hail represents the best and ideal solution for specialized and distinctive cleaning of all pieces of furniture and house rooms no matter the number of floors of the house and the number of rooms, where we work through a team trained on modern methods of cleaning using the latest steam cleaning machines that give outstanding results in cleaning sofas, boards, carpets and rugs It is also used to clean curtains and furnishings.Ceramic floors, chimneys and hoods are cleaned from hard fat stains and rust stains safely and completely.We also provide marble polishing services by providing the latest Italian marble polishing machines with the best types of detergents Its excellent cleaning and disinfecting houses cleaning company examples in Hail is the best choice and cheaper.
شركة تنظيف بحائل
شركة تنظيف فرش بحائل
شركة تنظيف مجالس بحائل
شركة تنظيف سجاد بحائل
شركة تنظيف منازل بحائل
شركة رش مبيدات بحائل
https://www.raya-hail.com

55555555 said...

sbobet
บาคาร่าออนไลน์
nova88
ibcbet
maxbet