Monday, April 13, 2015

Hydrophobic or just solvophobic?

As I mentioned in the previous post, the notion of a dewetting transtion – in effect, capillary condensation driven by enhanced density fluctuations – that drives hydrophobic attraction has yet to be fully integrated with the question of whether this is a generic solvophobic effect or something specific to water’s hydrogen-bonded network. David Chandler’s picture of a dewetting transition occurring between extended hydrophobic surfaces for a lateral size scale of around 1 nm or more has tended to focus on the impossibility of maintaining the integrity of the H-bonded network in this geometry. But it may be that the density depletion and enhanced fluctuations on which this picture is predicated are more general features of solvophobicity. Rick Remsing and John Weeks at the University of Maryland speak to this question in a preprint that aims to dissect this hydrophobic interaction into components related to hydrogen bonding and to longer-ranged dispersion and electrostatic forces between the solvent molecules (http://www.arxiv.org/abs/1502.05220). Their conclusions are so nicely summarized in the paper that I can’t do better by paraphrasing them:
“We employ short ranged variants of the SPC/E water model to show that small scale solvation and association in water is governed by the energetics of the hydrogen bond network alone. However when the solute is large and the hydrogen bond network is broken at the hydrophobic interface, water behaves in a manner qualitatively similar to a simple fluid, with unbalanced LJ attractions dominating the solvation behavior.”

For example, without LJ attractions in the solvent, there is no dewetting-induced hydrophobic attraction of two fullerene molecules. (This implies that the crossover between “small” and “large” solutes lies somewhere between the sizes of methane and C60.) In other words, dewetting here is nothing other than regular (albeit barrier-less) capillary evaporation of a solvent, and not a “water effect” at all. Which, if it’s right, means that we might want to think about speaking of a “hydrophobic interaction” at small scales but a “solvophobic interaction” at large scales. But I’d like also to know how this fits with Ronen Zangi’s study indicating that there’s actually a repulsion between fullerenes in water, mentioned in an earlier post. In other words, how potential-dependent is all this?

They’ve been busy. In another contribution, Remsing and Weeks add another variant to the many efforts to develop hydrophobicity scales for biomolecules. This one is based on electrostatics, which has the advantage of being able to predict water-mediated hydrophilic interactions as well as hydrophobic ones (JPCB jp509903n; 2015 – paper here). They begin with a nice description of efforts so far, making the fundamental distinction between “surface-based” methods which aim to use the biomolecular surface properties alone, and “water-based” methods in which the effects of surface topography and neighbouring chemical functionality on the hydrogen-bond network of the local hydration sphere are taken into account. Their new method calls into the latter category, but is computationally inexpensive as it aims to characterize the long-wavelength collective electrostatic response of the water to the surface in question. Not only does this distinguish between hydrophilic and hydrophobic surfaces, but it accounts for different types of hydrophilic surfaces, e.g. those the polarize the water molecules in different orientations. This allows them to identify situations where the approach of two hydrophilic surfaces might induce a water-mediated interaction because of the commensurate polarization of the water network.

That water penentrates into carbon nanotubes, despite its hydrophobic nature, has been confirmed both in simulations and in experiments. In a preprint (http://arxiv.org/abs/1501.0608), Hemant Kumar and colleagues at the Indian Institute of Science in Bangalore ask whether this is driven by entropy or energy. Previous studies have given conflicting answers, but on the basis of MD simulations using the two-phase thermodynamic method Kumar et al. conclude that both energy (the carbon-oxygen LJ interaction) and entropy (for low occupancy, at least) support the filling process. This seems consistent with the findings of J. P. Huang at Fudan University in Shanghai and colleagues that water flows several times faster through non-straight (zigzag) carbon nanotubes than through straight ones, owing to the greater LJ interactions in kinked channels (T. Qiu et al., JPCB 119, 1496; 2015 – paper here).



When a solute particle is excited (electronically, vibrationally, rotationally), how does the (water) solvent relax to the perturbation? Rossend Rey at the Polytechnic University of Catalonia and James Hynes at Colorado have examined this question using linear response theory, and conclude that most of the absorbed energy is transferred to hindered rotations (librations) of the water molecules – and that mostly in the first hydration shell (JPCB jp5113922; 2015 – paper here).

The M2 proton channel of influenza virus A is the target of several flu drugs. These appear to bind to the channel and disrupt the proton transport, which seems to involve water clusters in the channel. By calculating the energetics of pore blockers at different sites in M2, Michael Klein at Temple University and coworkers offer insights into the mechanisms of drug action that might guide the identification of new types of inhibitor (E. Gianti et al., JPCB 119, 1173; 2015 – paper here). The general principle is to dehydrate the pore by replacing the water clusters with the ligand scaffold, and the results here show that this is most effectively done when the ligand scaffold mimics the water-cluster contour, while also preserving the interactions that the cluster made with the protein.

Another water-containing channel is explored by Ai Shinobu and Noam Agmon at the Hebrew University of Jerusalem, and I like their opening line: “Internal water molecules in proteins are conceivably part of the protein structure”. Quite so. They look at the lone water molecule in the “barrel” of the proton-conducting green fluorescent protein, using MD simulations to examine how water exchange occurs following photoexcitation, which opens up the channel transiently (JPCB 119, 3464; 2015 – paper here). The water molecule is shifted by the formation of a water wire through a temporary “hole in the barrel” connecting the chromophore with the bulk: a weak spot between strands of the β-barrel. This wire provides a route for protons to leak out of the channel, and the authors think that this might in fact supply the dominant mechanism for proton escape from the protein. The water motion, meanwhile, involves interactions with hydrogen-bonding residues that result first in sub- and then super-diffusive motion.

How conformationally stable are proteins when dehydrated for storage? One way to find out is to look at water adsorption isotherms as a function of humidity for different conformations. This is what Pablo Debenedetti and coworkers at Princeton have done for the Trp-cage mini-protein using simulations of different protein matrices: crystal, powder, and thermally denatured powder (S. B. Kim et al., JPCB 119, 1847; 2015 – paper here). All three matrices display so-called type II adsorption isotherms, in which there is hysteresis between adsorption and desorption across most of the humidity range. The isotherms are all of similar shape, showing little sensitivity to the degree of ordering in the proteins. Moreover, all show similar changes in swelling behaviour and hydrogen-bonding content as a function of humidity, except for the degree of intra-protein H-bonding, which unsurprisingly depended on the degree of folding in the monomers.

A great deal of attention is now being focused on proteins that have no great degree of conformational regularity in the first place: intrinsically disordered proteins, such as the tau protein which regulates microtubule formation in the nervous system. Dysfuntions in tau can lead to protein aggregation and fibril formation of the sort associated with neurodegenerative diseases such as Alzheimer’s. Martin Weik at Grenoble and coworkers have used neutron scattering and MD simulations to compare the dynamical coupling of protein and solvent through the protein dynamical transition (at 240 K) for the tau IDP and a representative globular protein, the maltose binding protein (G. Schirò et al., Nature Commun. 6, 6490; 2015 – paper here). There is a general notion that the dynamical transition corresponds with the onset of hydration-water translational motion on the protein surface. But although IDPs also show a dynamical transition, they have considerably more solvent-accessible surface than globular proteins, so it is by no means clear that one can expect the same kind of water-protein coupling to apply. But it seems that it does. Martin and colleagues find that in both cases the onset of water translational diffusion seems to coincide with that of large-amplitude protein conformational fluctuations, of the sort needed for functional behaviour. Thus this connection seems to be independent of the protein’s folding state.

What effect do osmolytes such as urea (a denaturant of globular proteins) have on IDPs? That question is explored by Zachary Levine and colleagues at UCSB using a combination of simulations and experiments (PNAS 112, 2758; 2015 – paper here). They find that both urea and trimethylamine N-oxide (TMAO) affect the structure of tau by shifting the distribution of existing conformations rather than by adding any new ones. The osmolytes do so by altering the balance between hydrogen-bonding and salt-bridge interactions in the individual IDPs. In doing so, urea suppresses aggregation, while TMAO promotes the formation of compact oligomers. The mechanism of the latter is subtle, stemming from changes in hydration of the IDP in the presence of TMAO in such a way as to promote aggregation entropically by releasing TMAO and water from the protein surfaces. These predictions of the simulations are borne out by experiments.

Urea can denature RNAs too. Alexander MacKerell at Maryland and colleagues have investigated why (K. Kasavajhala et al., JPCB 119, 3755; 2015 – paper here). The general idea has been that urea forms H-bonds and stacking interactions with the nucleotide bases. That’s a view that is supported by these ab initio calculations, which show that stacking via dispersion forces as well as H-bonding create cage-like complexes around the bases. For example, guanine may become surrounded by 5 urea molecules and 12 waters, pretty decisively trapping it in an unfolded conformation. Direct interactions, you see.

MacKerell also has an interesting paper with E. Prabhu Raman on the energetics of protein-ligand binding (JACS 137, 2608; 2015 – paper here). They have looked in particular at the roles of water in the binding site, and especially the classical view that the “hydrophobic effect” in ligand binding is due to the reduction of nonpolar solvent-exposed area at the binding interface and the concomitant release of more “highly structured” water from this location. To calculate changes in solvation energy as a ligand binds, they use something called Grid Inhomogeneous Solvation Theory (GIST), described by Nguyen et al. in J. Chem. Phys. 137, 044101 (2012). They calculate the various thermodynamic contributions to the binding energy for propane and methanol in several different binding pockets of the proteins Factor Xa and P38 MAP kinase. While they find that the entropy of reorganization of water in the binding pockets favours ligand binding, much as the traditional picture of an entropically driven hydrophobic effect would suggest, the picture is actually rather complex, with subtle interplay between direct protein-ligand interaction energies (even in nonpolar sites) and loss of water interaction energies that can sometimes compensate and lead to a rather small binding enthalpy. Sometimes the enthalpic and entropic changes can oppose (compensate) each other, sometimes they reinforce one another. The general message seems to be that, much as some earlier studies have shown, it is difficult to generalize about the respective contributions to the binding thermodynamics.

More on antifreeze proteins: Aatto Laaksonen and colleagues at Stockholm University show that representatives of the two major classes of AFPs (“hyperactive” and “moderately active”) have different effects on the nature of the ice-water interface when they are bound there (G. Todde et al., JPCB 119, 3407; 2015 – paper here). For the former class, they study the snow flea AFP; for the latter, the winter flounder AFP. Both AFPs increase the thickness of the interfacial region (defined as the region where water diffusion varies from 10 to 90% of the bulk liquid value), with the hyperactive AFP having the greatest effect (widening by 25-40%). This protein has ~25% more hydrophobic surface (the ice-binding side) than the wfAFP, but also 60-70% more hydrophilic surface; the authors think that it’s the first of these differences that counts the most.


The snow flea (a) and winter flounder (b) antifreeze proteins bound at the ice-water interface.

Ariel Fernandez has reported further evidence that the protein regions he calls dehydrons – parts of the backbone where hydrogen bonds in the backbone are “imperfectly wrapped” and thus solvent-exposed – may play not just a structural but also a chemical role (FEBS Letters 589, 967; 2015 – paper here). He has previously argued that water molecules in dehydron regions can act as proton acceptors because of the way that confinement prevents them from orienting their dipoles perfectly with the prevailing electric fields. Now, using quantum calculations, he expands on how this behaviour makes dehydrons activators of nucleophilic groups, and looks at some biochemical consequences, in particular for cancer-related mutations of certain kinases. The nucleophilicity induced by the dehydron, he says, turns the kinase constitutively (and hazardously) active for phosphorylation.

37 comments:

Julio said...

I am surprised that you are still reporting on the work of Ariel Fernandez. Are you unaware of the various Expressions of Concern about his papers (including the Nature paper that you did a story on) and investigations into his work?

http://retractionwatch.com/category/ariel-fernandez/

Unknown said...

The recently discovered chemical role of protein packing defects (dehydrons) may have important ramifications for biotechnology. This aspect is explored in my new book "Biomolecular Interfaces: Interactions, Functions and Drug Design" (Springer, 2015). You may read some excerpts at

http://books.google.com.ar/books?hl=en&lr=lang_en&id=6JxwCAAAQBAJ&oi=fnd&pg=PR7&ots=DiKy34cFRO&sig=Rnq5RdwQcpIgR2buAymWUt_bXxg&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false

Unknown said...

Julio: This blog does not allow anonymous comments. Please don't hide in anonymity to attack me. That is the despicable way of the coward. In fairness, readers would want to read an in-depth analysis of the way in which Retraction Watch operates as revealed here:
https://scienceretractions.wordpress.com/2014/12/01/interview-with-dr-ariel-fernandez-on-the-nature-paper-controversy/

Weishi Meng said...

Prof. Ariel Fernandez is a target of angry individuals operating within the umbrella of the misnamed "post publication peer review", which consists of people hiding in anonymity, with no verifiable credentials, and who are nobody's peers. One such person is Joshua L. Cherry, presumed to be an NIH software contractor, who is embarked in a crusade against Prof. Fernandez. If an honest person has something to say about Dr. Fernandez's research, he should step forward, identify himself and subject his challenge to the same peer review process that Dr. Fernandez's publications have been subject to. If the challenge passes peer review, Prof. Fernandez should be invited to respond and the entire conflict should be brought out in the open. This is how science has dealt with challenges for centuries, and the way it should deal with the Fernandez case.
The Fernandez case is described here:
https://scienceretractions.wordpress.com/2014/12/01/interview-with-dr-ariel-fernandez-on-the-nature-paper-controversy/

Weishi Meng said...

The problem with the so-called post publication peer review (PPPR) is that we have no evidence that the anonymous reviewers are scientists' peers. This is fundamentally different from the reviewers picked by journal editors and kept anonymous by the journals. Consequently, the blogs that serve as vehicle for PPPR become the means for deranged losers to spit their angry harangues or launch their personal attacks. To add to the infamy, the blogs, especially Retraction Watch, amplify these aberrations in defamatory terms. Read more on this problem here:

https://scienceretractions.wordpress.com/2015/05/01/retraction-watch-clare-francis-the-mockery-of-the-first-amendment-and-a-recent-court-order/

Unknown said...

The article is very nice and excellent to read

IB ONLINE TUTOR said...
This comment has been removed by a blog administrator.
Unknown said...
This comment has been removed by a blog administrator.
sciencebod said...
This comment has been removed by the author.
sciencebod said...
This comment has been removed by the author.
Unknown said...
This comment has been removed by a blog administrator.
sciencebod said...
This comment has been removed by the author.
sciencebod said...
This comment has been removed by the author.
maikaljj said...

Wonderful, just what a blog it is! This blog has provided the helpful data to us continue the good work.
Henry

Timothy W. Pothier said...

Nice blog. You are provided resourceful information about solvophobic. I extol of this article.

Timothy W. Pothier

3nod maka said...

احصل على خدمة كشف التسريبات الان باقل الاسغار فبط من خلال اكبر شركة تنظيف خزانات فى مكة اتصل بنا الان وتعرف على المزيد من خدماتنا
فقط من خلال رقم هاتف : 0555132104
او زيارة موقعنا الالكترونى
http://www.el3nod.com/1/company-tanks-isolation-cleaning-mecca

DIVYASHAKTHY SOFTTECH INDIA PVT LTD said...

Great post.
I think best information here. I like it very much
We all are appreciating your blog.
Nano catalytic instant water converter

Sean Parker said...

I think it would be a combination of both.
meet and greet at heathrow

Unknown said...

اتصل الآن على شركة صيانة يونيون اير و فريق خدمة العملاء سيقوم بالتواصل معك دائما من أجل أن يساعدك في كل ما تحتاج إليه و شركة يونيون اير تمتلك فريق كبير من الخبراء و المهندسين أصحاب الخبرة و المهارة في تصليح المكيفات و صيانة تكييفات يونيون اير تتعامل مع جميع أنواع المكيفات و تعمل على إصلاحها من كافة العيوب في اسرع وقت ممكن

http://www.unionairemaintenance.com

hair said...

يعمل مركز زراعة الشعر على توفير أفضل الخدمات التي تعمل على تحقيق أفضل النتائج إلى العملاء و هذا لأننا خبراء في عملنا و نحاول أن نقدم إليكم كل ما ترغبون به من خدمة بأعلى مستوى من الجودة في عمليات زراعة الشعر بأفضل الأساليب


http://www.hairtransplant1.com/

umbrellas rawadaltaswir said...

يمكنك الحصول على أفضل مظلات حدائق التي تعمل على توفير الحماية من التعرض إلى أشعة الشمس و هذا لأننا نرغب في أن نقدم إليكم كل ما تريدونه من خدمات مميزة و مظلات سيارات تتم باتباع أجود الخامات

Unknown said...

Water behaves in a manner qualitatively similar to a simple fluid.
cheap Heathrow airport parking

Unknown said...

تجتهد شركة امن وحراسة على توفير أفضل الخدمات التي تعمل على إرضاءالعملاء و تحقيق الحماية الكاملة لهم فنحن نعمل على أن نقدم إليكم أحدث الإمكانيات التي لا مثيل لها في شركة حراسات خاصة التي تعتمد على فريق من الضباط و افراد الأمن المتميزون في عملهم و شركة حراسات امنية تستخدم أحدث الإمكانيات في العمل

thanida said...

hanks for sharing. we have got a clear idea about it.
tbsbet

صيانة كريازي said...

إذا كنت تعاني من أعطال الأجهزة اكلهربائية يمكنك أن تحصل على خدمات صيانة كريازي التي تعمل على معالجة الأعطال الموجودة في الاجهزة من ثلاجات ، غسالات و غيرها من الأجهزة الاخرى و يمكنك الاتصال على رقم صيانة كريازي و سنقوم بتقديم المساعدة اللازمة لكم

dokdok said...

เผาผลาญไขมัน ไม่มีอันตราย เป็นเทคโนโลยี ที่มีคุณภาพสูงสำหรับการเผาผลาญไขมันส่วนเกิน
เครื่องจะตรวจจำนวนไขมัน และก็คำนวนพลังงานที่จำเป็นต้องใช้อัตโนมัติ รวมทั้งพวกเราจะใช้เครื่องไม้เครื่องมือยิงคลื่น
อัลตร้าซาวด์เข้าไปในรอบๆที่ได้ทำเครื่องหมายไว้อย่างสม่ำเสมอ โดยไม่เจ็บต่อเยื่อรอบๆ ใกล้เคียง ไม่ว่าจะเป็นผิวหนังข้างบน เซลล์ประสาท หรือ เส้นโลหิต ต่อจากนั้นเซลล์ไขมันจะถูกแปลงให้เป็นของเหลวแล้วถูกซึมซับไปสู่กระแส เลือด แล้วถูกนำไปเผาผลาญโดยระบบการกำจัดไขมันของ
ร่างกายตามธรรมชาติ ทำให้ท่านสัมผัสได้ถึงรูปร่างที่กระชับแล้วก็เรียบเนียนขึ้นในทันทีข้างหลังการดูแลรักษา โดยไม่เป็นผลใกล้กันใดๆก็ตามต่อสุขภาพรวมทั้งสามารถดำเนิน
ชีวิตตามธรรมดา โดยไม่ต้องพักรักษาตัว

สลายไขมัน กระชับสัดส่วน
สลายไขมัน ไม่ผ่าตัด

supersonic100g9 said...

พวกเราให้บริการรถเช่าพร้อมผู้ขับ พนักงานขับรถยนต์ของ BANANA rent-a-car จะรอให้ความสบายสบายแก่กับลูกค้าสำหรับในการเดินทาง ทำให้ลูกค้าเดินทางไปถึงจุดมุ่งหมายโดยสวัสดิภาพรวมทั้งเร็ว ด้วยผู้ขับที่มากประสบการณ์สำหรับในการขับขี่รถยนต์ ชำนิชำนาญทางอีกทั้งในจ.กรุงเทพฯ แล้วก็บ้านนอก และยังได้รับการฝึกอบรมการใช้แรงงานรถยนต์ รวมทั้งความประพฤติปฏิบัติการให้บริการที่ยอดเยี่ยมทุกคน ทำให้ลูกค้ามั่นอกมั่นใจได้ว่า รถเช่าพร้อมผู้ขับ ของBANANA rent-a-car เป็นบริการรถเช่าพร้อมผู้ขับที่ดีเยี่ยมที่สุด
เช่ารถพร้อมคนขับ
เช่ารถดอนเมือง
เช่ารถรายวัน
บริการรถเช่า
รถเช่ากระบะ

Adreana Joseph said...

I am really happy to say it’s an interesting post to read. I learn new information from your article, you are doing a great job. Keep it up
Take a look at this wonderful site for collecting Roblox Music Codes

RoseSlot2020 said...

เล่นเกม สล็อต joker แจกเครดิตฟรี โบนัสเพียบ slot online
https://www.slot4u.com/joker123

kemika7384 said...

918kiss เครดิตฟรี 100 สามารถหาถึงที่กะไว้เว็บพนัน pussy888 เพียงแค่นั้น
สำหรับในการที่ขาพนันจะหารายได้เครดิตฟรีได้นั้นในเว็บพนันออนไลน์ ขาพนันก็ต้องหาเว็บพนันที่มีโปรโมชั่นดังกล่าวข้างต้นถึงจะได้รับเครดิตฟรีเงินดังที่กล่าวถึงมาแล้ว ซึ่งในที่นี้พวกเราขอชี้แนะเว็บพนันออนไลน์ที่ชื่อว่า pussy888 ซึ่งเป็นเว็บไซต์ที่ทำให้ขาพนันได้เจอกับเงินเครดิตฟรีที่อยาก โดยขาพนันจะได้รับเครดิตฟรีจาก 918kiss เครดิตฟรี 100 ก็คือเป็นในลักษณะที่ขาพนันจะได้เครดิตฟรีถึง 100 บาท เลย แต่จะได้ในลักษณะเป็นอย่างไรนั้น ในที่นี้พวกเราจะมีการชี้แจงให้ขาพนันได้ฟังกัน
918kiss เครดิตฟรี 100 ขาพนันสามารถชักชวนสหายเว็บไซต์ pussy888 ก็ได้รับเงินกล้วยๆแล้ว
ธรรมดาแล้วเครดิตฟรีนั้น ขาพนันจะได้ก็เมื่อจะต้องปฏิบัติตามกฎข้อแม้ของเว็บพนันก่อน เว็บไซต์ pussy888 ก็ด้วยเหมือนกันมีกฎมีระบบระเบียบให้ท่านได้กระทำตาม ซึ่งง่ายสุดๆเลยเพียงขาพนันทำเชิญสหายๆมาเล่นในเว็บไซต์แห่งนี้ โดยการเชิญชวนนั้นก็ชักชวนทั้งยังการลงทะเบียนและก็การเติมเงินเล่นในเกม ก็เลยจะก่อให้ขาพนันได้รับเครดิตฟรีที่เป็น 918kiss เครดิตฟรี 100 บาท
pussy888หมายถึงเว็บไซต์ที่มี 918kiss เครดิตฟรี 100 บาท ให้ขาพนันได้พนันสำหรับเพื่อการเล่นเกมพนันถัดไป
การเล่นพนันนั้นถ้าหากว่าไม่มีเงินที่ใช้ในการเดิมพันแล้วแน่ๆว่าเกมพนันดังที่ได้กล่าวมาแล้วข้างต้นก็อาจจะไม่อาจจะก้าวเดินต่อไปได้ แม้กระนั้นหากมีเงินพนันที่พอเพียงการเล่นเกมพนันก็เล่นถัดไปได้ และก็สำหรับในการใช้เงินที่ใช้ในการเดิมพันสำหรับการเล่นเกม ครั้งคราวขาพนันก็อยากได้เงินแบบฟรีๆซึ่ง pussy888 เป็นเว็บไซต์ที่มี 918kiss เครดิตฟรี 100 บาท ให้ขาพนันได้นำเงินปริมาณ 100 บาท นั้น ไปเล่นเกมถัดไปได้ แล้วก็จะส่งผลทำให้ขาพนันได้ร่วมลุ้นถัดไปอีกว่าจะได้โอกาสถูกแจ็คพ็อตของเกมหรือเปล่านอกเหนือจากเงินรางวัลที่กำลังจะได้ในเรื่องที่ชนะการพนันแล้ว
จะมองเห็นได้ว่า เว็บพนันออนไลน์ pussy888 เป็นเว็บไซต์ที่ดีต่อจิตใจขาพนันเป็นที่สุด เพราะเหตุว่าเป็นเว็บไซต์ที่มี 918kiss เครดิตฟรี 100 บาท นั่นเอง ก็เลยทำให้ขาพนันหลายคนถูกใจที่จะเข้ามาเล่นที่เว็บนี้เป็นอย่างยิ่ง แต่ว่าในเรื่องของเครดิตฟรีในเว็บ pussy888 ไม่ใช่มีเพียงเท่านี้ แม้กระนั้นยังมีเครดิตฟรีในส่วนฯลฯ อาทิเช่น การฝากเงินทีแรกเมื่อขาพนันได้ทำลงทะเบียนแล้ว ขาพนันก็รับกล้วยๆไปเลยอีก 50% หรือขาพนันจะทำฝากเงินเพื่อเล่นในเกมหลายครั้งก็ได้เพื่ออยากโบนัสทุกๆยอดของการฝากอีก 10% ก็สามารถที่จะทำเป็นด้วยเหมือนกัน
918kiss

Unknown said...

[b]pgslot[/b] เกมสล็อตอออนไลน์ slot online เล่นง่ายได้จริงไม่มีโกง
[url=http://]https://www.slotv9.com/pgslot[/url]

Unknown said...

เว็บไซด์เกมออนไลน์มหาสนุก เครดิตฟรี pgslot เกมสล็อตอออนไลน์
https://www.slotv9.com/pgslot

lovely boy said...

Thanks a bunch for sharing this with all people you actually recognize สล็อตxo what you are speaking about! Bookmarked

yaacovqueeney said...

Gambling Casino & Resort Tickets - JT Hub
Tickets 창원 출장샵 for Gambling Casino & Resort 용인 출장샵 at 여주 출장샵 Harrah's Casino and Resort in Las Vegas are available 김제 출장샵 at the 경기도 출장마사지 official Harrah's website.Mar 16, 2021

shamsarab said...

تركيب فورسيلنج دبي

تركيب جبس بورد في الفجيرة

صباغ في الشارقة

اعمال الاصباغ والديكور

صباغ في دبي

تركيب جبس بورد الشارقة

تركيب جبس بورد رأس الخيمة

صباغ فى رأس الخيمة

تركيب جبس بورد دبي

تركيب فورسيلنج الشارقة

omar said...

نقل عفش

نقل عفش الكويت

تركيب اثاث ايكيا

نجار ايكيا

نجار الكويت

نجار ايكيا

نقل عفش وتركيب الاثاث بالكويت said...

ارقام نقل عفش الكويت تغليف اثاث الكويت نقل عفش الكويت الجهراء نقل عفش رخيص الكويت نقل عفش الكويت رخيص واحترافي شركة نقل عفش الكويت افضل شركة نقل عفش الكويت اسعار شركة نقل عفش الكويت

نقل عفش حولي الاحمدي مبارك الكبير الفروانيه الجهراء

نقل عفش

نقل عفش

نقل عفش الكويت

نقل عفش